Estandarización de la técnica de ELISA para el diagnóstico de Toxocariasis humana

Autores/as

  • Yrma Espinoza Instituto de Medicina Tropical “Daniel A. Carrión”, UNMSM; Departamento Académico de Microbiología Médica, Facultad de Medicina, UNMSM
  • Pedro Huapaya Instituto de Medicina Tropical “Daniel A. Carrión”, UNMSM
  • Roxana Suárez Instituto de Medicina Tropical “Daniel A. Carrión”, UNMSM; Departamento Académico de Microbiología Médica, Facultad de Medicina, UNMSM
  • Victoria Chávez Servicio de Laboratorio, Hospital Nacional “Edgardo Rebagliati Martins”-EsSalud,
  • Carlos Sevilla Departamento Académico de Microbiología Médica, Facultad de Medicina, UNMSM
  • Elizabeth Dávila Instituto de Medicina Tropical “Daniel A. Carrión”, UNMSM
  • Alina Huiza Instituto de Medicina Tropical “Daniel A. Carrión”, UNMSM; Departamento Académico de Microbiología Médica, Facultad de Medicina, UNMSM
  • César Naquira Instituto de Medicina Tropical “Daniel A. Carrión”, UNMSM; Instituto Nacional de Salud
  • Pilar Alva Departamento Académico de Microbiología Médica, Facultad de Medicina, UNMSM

DOI:

https://doi.org/10.15381/anales.v64i1.1407

Palabras clave:

Toxocara canis, toxocariasis, serología, ELISA.

Resumen

Objetivo: Estandarizar la técnica ELISA para el diagnóstico de infección humana por Toxocara canis con antígeno excretado-secretado preparado en nuestro medio. Material y métodos: Se colectó huevos de T. canis y se les incubó con formol (2%) a 28oC hasta obtener larvas de tercer estadio, las que luego de ser liberadas fueron incubadas en RPMI a 37°C por 7 días; se reemplazó el medio por otro similar y almacenó a -20°C. Se concentró el antígeno y se dosó proteínas. Para la técnica de ELISA se utilizó sueros de pacientes con toxocariasis y de niños recién nacidos, como controles positivos y negativos, respectivamente, diluidos desde ¼ hasta 1/1024. Se sensibilizó placas de poliestireno con varias concentraciones de antígeno, utilizándose conjugado de peroxidasa e IgG de carnero anti IgG humana y sustrato OPD. Se realizó lectura de absorbancia a 492 nm con espectrofotómetro (Multiskan plus labsystems), siendo el punto de corte el promedio aritmético de la absorbancia de los sueros negativos más 3 desviaciones estándar. Resultados: La concentración óptima del antígeno fue 50 ug/mL, la dilución del suero 1/128, la dilución del conjugado 1/1000 con densidad óptica mayor a 0,241. Conclusiones: La técnica de ELISA para diagnóstico serológico de infección humana por Toxocara canis podría ser utilizada en estudios epidemiológicos en nuestro país. Queda pendiente la evaluación de su eficacia en futuros estudios.

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Publicado

2003-03-17

Número

Sección

Trabajos originales

Cómo citar

1.
Espinoza Y, Huapaya P, Suárez R, Chávez V, Sevilla C, Dávila E, et al. Estandarización de la técnica de ELISA para el diagnóstico de Toxocariasis humana. An Fac med [Internet]. 2003 Mar. 17 [cited 2024 Mar. 28];64(1):7-12. Available from: https://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/anales/article/view/1407