INMOVILIZACIÓN DEL VENENO DE LA SERPIENTE PERUANA BOTHROPS ATROX EN COLUMNA DE AFINIDAD PARA LA OBTENCIÓN DEL ANTIVENENO ESPECÍFICO
Palabras clave:
veneno, Bothrops atrox, Sepharosa 4B-BrCN, anticuerpos, cromatografíaResumen
Se ha inmovilizado el veneno de la serpiente peruana Bothrops atrox para la obtención de anticuerpos específicos a partir del suero de conejos albinos previamente inmunizados mediante cromatografía de afinidad. El veneno (100 mg) fue acoplado a 1 g de Sepharosa 4B-BrCN y la resina empaquetada en una columna cromatográfica de 0.8 x 6.0 cm. Esta columna fue utilizada para la purificación de anticuerpos específicos a partir de suero de conejos machos albinos Nueva Zelanda (2 kg) inmunizados con el veneno de B. atrox. El suero (1 mL) fue aplicado a la columna y las fracciones proteicas se eluyeron sucesivamente con NaCl 0.15 M, pH 6.0 y buffer glicina-HCl 0.1 M, pH 2.5. La cuantificación de proteínas se realizó por métodos espectrofotométricos. La inmovilización del veneno de B. atrox en el gel permitió obtener una columna de afinidad para la obtención de anticuerpos anti-B. atrox, los cuales fueron eluídas con buffer glicina-HCl 0.1 M, pH 2.5, recuperándose 100 μg de estos anticuerpos por mL de suero. Se concluye que el uso de la columna de Sepharosa 4B-BrCN permitió obtener anticuerpos purificados contra el veneno de B. atrox
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Derechos de autor 2011 G. A. Sandoval P., F. Lazo M., E. Rodríguez Q., J. Mendoza F., A. Yarlequé Ch.
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