Expresión de los Genes de los Receptores TCR-delta en la Mucosa Yeyunal de Crías de Alpaca (Vicugna pacos)

Simón Mendizábal J, Alberto Manchego S, Gina Castro S., Mercy Ramirez V., Nieves Sandoval C., Danilo Pezo C.

Resumen


El objetivo de este estudio fue determinar la expresión de genes del receptor TCRγδ (gamma y delta) en el epitelio yeyunal de 16 crías de alpaca aparentemente sanas, de 2 a 47 días de edad, mediante la cuantificación de ARN mensajero (ARNm) utilizando cebadores específicos. Se tomaron porciones de yeyuno (2 cm de longitud). El ARNm total de la mucosa de la porción media del yeyuno actuó como molde para la síntesis de ADN complementario mediante transcripción reversa (RT), seguida de un PCR-tiempo real para la amplificación y cuantificación de los ARNm de los polipéptidos que conforman las cadenas gamma y delta del TCR. Se utilizó el método 2-ΔΔCt para la cuantificación relativa de ARNm, teniendo como calibrador a dos crías neonatas que no habían consumido calostro. Las crías de 1, 2, 3 y ≥4 semanas de edad expresaron el gen gamma en 4.75, 6.78, 16.24 y 103.11 veces lo expresado por los animales calibradores, respectivamente, y el gen delta fue expresado en 9.43, 20.78, 25.08 y 146.46 veces, respectivamente. Los resultados demuestran que los genes gamma y delta se expresan en forma creciente con la edad, y significativamente a partir de la cuarta semana de edad (p<0.05), indicando que los linfocitos Tγδ se incrementan en la mucosa intestinal con la edad.

Palabras clave


alpacas; TCR; gamma; delta; RT-PCR tiempo real; cuantificación relativa

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DOI: http://dx.doi.org/10.15381/rivep.v28i4.13928

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