ANÁLISIS In vitro e in vivo DE SOBREDONANTES CRUDOS DE Clostridium perfringens AISLADOS DE CASOS DE ENTEROTOXEMIA EN ALPACAS.

David Pérez J., Luis Llanco A., Hugo Castillo D., Álvaro Véliz A., Iván Carhuallanqui P, Luis Luna E., Pablo Londoñe B., Roxane Piazza F., Raúl Rosadio A., Lenin Maturrano H.

Resumen


Se reportan evaluaciones de sobrenadantes bacterianos (nativos) crudos obtenidos de 24 aislados de C. perfringens de casos fatales de enterotoxemia buscando caracterizar propiedades lecitinasas, hemolíticas, citotóxicas in vitro y enterotóxicas in vivo de la exotoxina fosfolipasa C (Cp-PLC). Los aislados (12 en estados vegetativos y 12 esporulados) contenían el gen cpa (genotipo A), y seis de ellos tenían además el gen cpb2, pero todos carecían del gen de la enterotoxina (cpe). Las actividades lecitinasas fueron evaluadas, en microplacas, usando emulsiones de yemas de huevo; las hemolíticas y perfringolisina en microplacas, usando eritrocitos de carnero y de equino respectivamente; las citotóxicas, en células HEp-2; y las enterotóxicas en conejos inoculados intraintestinalmente. Los aislados fueron clasificados, de acuerdo a los niveles de la actividad lecitinasa, en cepas de alta, mediana y baja producción de Cp-PLC. La mayoría de aislados (66.6%) en estados vegetativos mostraron perfiles de alta y mediana producción de Cp-PLC, mientras que la totalidad de los esporulados fueron de baja producción. Todos los aislados altamente productores de Cp-PLC fueron citotóxicos y mostraron las mayores actividades hemolíticas (24.0 ± 8.4 u.a.h). A pesar de que el 66.6% (n=16) de los aislados indujeron acumulación de fluido intestinal (0.12-0.47 mL/cm), ninguno fue capaz de generar lesiones intestinales en conejos, similares a las descritas en la enterotoxemia. Los sobrenadantes crudos de los aislados evidenciaron la presencia de otras toxinas tipo hemolisinas, citotoxinas y enterotoxinas, distintas a Cp-PLC, CPE y toxina â2, que necesitan ser investigadas a fin de elucidar su posible rol en la etiopatogénesis de la enterotoxemia en alpacas.

Palabras clave


Clostridium perfringens; enterotoxemia; Cp-PLC.

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DOI: http://dx.doi.org/10.15381/rivep.v23i3.915

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Copyright (c) 2012 David Pérez J., Luis Llanco A., Hugo Castillo D., Álvaro Véliz A., Iván Carhuallanqui P, Luis Luna E., Pablo Londoñe B., Roxane Piazza F., Raúl Rosadio A., Lenin Maturrano H.

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