Optimización del test de micronúcleos en linfocitos cultivados usando una metodología de gradiente y frotis

  • Erika Castillo 1 Centro de Genética y Biología Molecular. Facultad de Medicina Humana, Universidad de San Martín de Porres, Alameda del Corregidor 1531, La Molina, Lima, Perú. Tel. 511 3652300 anexo 152. 2 Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional Mayor de San Marcos
  • María Luisa Guevara-Fujita 1 Centro de Genética y Biología Molecular. Facultad de Medicina Humana, Universidad de San Martín de Porres, Alameda del Corregidor 1531, La Molina, Lima, Perú. Tel. 511 3652300 anexo 152.
  • Ricardo Fujita 1 Centro de Genética y Biología Molecular. Facultad de Medicina Humana, Universidad de San Martín de Porres, Alameda del Corregidor 1531, La Molina, Lima, Perú. Tel. 511 3652300 anexo 152.
Palabras clave: biomonitoreo humano, Proyecto HUMN, genotoxicidad, citogenética, protocolo.

Resumen

El test de micronúcleos en cultivo de linfocitos es una prueba validada para estudiar mutagenicidad. Consiste en detectar material nuclear interfásico dañado, producto de fragmentación cromosómica o errores de división nuclear en 2000 células binucleadas con citoplasma definido. El protocolo estándar deriva de la preparación citológica de cromosomas de sangre periférica con solución hipotónica, lavados de fijador y goteo de láminas. Nosotros proponemos modificaciones para mejorar el número y la observación de los micronúcleos. Primero se purifica linfocitos de glóbulos rojos antes del cultivo, luego de 72 horas, se elimina la solución hipotónica y los lavados repetidos con fijador, y finalmente se coloca las muestras en láminas por frotis en vez de goteo. Con las modificaciones obtenemos mas células binucleadas bien definidas (un promedio de 8 veces más por lámina) mejorando la eficiencia de este test.

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Publicado
2011-08-26
Cómo citar
Castillo, Erika, María Luisa Guevara-Fujita, y Ricardo Fujita. 2011. Optimización Del Test De Micronúcleos En Linfocitos Cultivados Usando Una Metodología De Gradiente Y Frotis. Revista Peruana De Biología 18 (2), 261 -63. https://doi.org/10.15381/rpb.v18i2.241.
Sección
Notas científicas