Clonación, expresión y evaluación inmunológica de la proteína Omp31 de Brucella melitensis y evaluación de su posible uso para el diagnóstico en brucelosis bovina

  • Jose David Rosales Rangel Centro de Inmunoproducción Masiva de Anticuerpos, Fundación Instituto de Estudios Avanzados (IDEA), Caracas
  • Annie Castillo Ochoa Centro de Inmunoproducción Masiva de Anticuerpos, Fundación Instituto de Estudios Avanzados (IDEA), Caracas
  • Armando Reyna Bello Carrera Ingeniería en Biotecnología, Departamento de Ciencias de la Vida, Universidad de las Fuerzas Armadas ESPE, Santo Domingo
  • Ana Teresa Serrano Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Central de Venezuela, Maracay
  • Rodolfo Fernandez Gomez Carrera Ingeniería en Biotecnología, Departamento de Ciencias de la Vida, Universidad de las Fuerzas Armadas ESPE, Sangolquí
Palabras clave: brucelosis, Omp31r, proteína recombinante

Resumen

El diagnóstico serológico de la brucelosis se lleva a cabo por la detección de anticuerpos generados contra el liposacárido “LPS” o extractos bacterianos de células enteras por ELISA o pruebas de aglutinación. El objetivo del trabajo fue evaluar una proteína recombinante que pueda ser usada en el diagnóstico serológico de la brucelosis bovina. Se escogió el gen de la Omp31 de Brucella melitensis 16M. El gen fue clonado a partir de ADN de B. melitensis. La expresión de la proteína Omp31r se realizó en un sistema de expresión procariota utilizando el vector pET28a y la purificación por cromatografía de afinidad a metales (IMAC). Un ELISA indirecto fue estandarizado utilizando sueros controles de bovinos positivos y negativos. La proteína Omp31r reaccionó con los sueros controles positivos y logró discriminarlos frente a los sueros negativos. La sensibilidad y especificidad del ensayo de ELISA fue de 77.2% y de 90.6%, respectivamente. Este sistema de ELISA indirecto puede ser útil para los diagnósticos rápidos de grandes números de muestras en el diagnóstico de la brucelosis bovina.


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Biografía del autor/a

Jose David Rosales Rangel, Centro de Inmunoproducción Masiva de Anticuerpos, Fundación Instituto de Estudios Avanzados (IDEA), Caracas

Investigador, Area de Salud.Centro de Inmunoproduccin de Anticuerpos y Unidad de Pesquisa Neonatal.

Busqueda de antigenos y anticuerpos recombinantes "NanoAnticuerpos" para el desarrollo de test de diagnostico en enfermedades humanas, veteinarias y agricolas.

Publicado
2018-09-06
Cómo citar
Rosales Rangel, J. D., Castillo Ochoa, A., Reyna Bello, A., Serrano, A. T., & Fernandez Gomez, R. (2018). Clonación, expresión y evaluación inmunológica de la proteína Omp31 de Brucella melitensis y evaluación de su posible uso para el diagnóstico en brucelosis bovina. Revista De Investigaciones Veterinarias Del Perú, 29(3), 996-1008. https://doi.org/10.15381/rivep.v29i3.14008
Sección
Artículos Primarios