Efecto de la criopreservación en el potencial de membrana plasmática en espermatozoides de alpaca (Vicugna pacos)

Resumen

El potencial de membrana es la diferencia eléctrica entre el interior y exterior de una célula, y la despolarización es la reducción del valor negativo de este potencial. Este estudio buscó determinar el estado del potencial de membrana plasmática de los espermatozoides de alpaca tras la criopreservación, utilizando la intensidad de fluorescencia como medida. Se emplearon 32 muestras de espermatozoides epididimarios sometidas a un protocolo de criopreservación estándar. Cada muestra fue evaluada antes y después del proceso. Se utilizó el fluorocromo DIsBAC2(3) a 15 µm durante 30 min y Ioduro de Propidio (PI) 12 µM a 37 °C durante 10 min para analizar la despolarización de la membrana y la viabilidad, respectivamente. Las mediciones se realizaron con un citómetro de flujo que contenía un analizador de imágenes, usando un láser de excitación de 488 nm y los canales de detección Ch03 y Ch05 para DisBAC2(3) y PI, respectivamente. La intensidad media de fluorescencia de DisBAC2(3) en los espermatozoides vivos frescos fue de 3176 ± 1398, mientras que en los descongelados fue de 2356 ± 1206 (p<0.05). Los resultados sugieren que la criopreservación, en promedio, reduce la intensidad de fluorescencia de DisBAC2(3), lo que puede interpretarse como una hiperpolarización de la membrana plasmática después del descongelamiento.