EVALUACIÓN in vitro DE LA RESPUESTA LEUCOCITARIA DE ALPACAS (Vicugna pacos) EN PRESENCIA DE ANTÍGENOS CLOSTRIDIALES
DOI:
https://doi.org/10.15381/rivep.v24i4.2742Palabras clave:
Camélidos sudamericanos, enterotoxemia, citoquinas, RT-PCR en tiempo realResumen
El objetivo del presente estudio fue evaluar la expresión de citoquinas proinflamatorias de leucocitos circulantes de alpaca al enfrentarlos a extracto total de Clostidium perfringens (componentes estructurales y toxinas). Se colectó sangre entera de la vena yugular de 5 alpacas hembras y 5 alpacas machos adultos. Los leucocitos fueron separados utilizando cloruro de amonio para lisar los eritrocitos, seguido de centrifugación y luego cultivados a una concentración de 500 000 leucocitos/ml de medio MEM (Medio Mínimo Esencial) en placas de cultivo de 12 pocillos. Simultáneamente, fueron enfrentados a extracto total de C. perfringens cultivados en caldo tioglicolato a concentraciones de 400, 80, 16, 0.8 y 0.2 μg/ml, para luego cuantificar, mediante la RTPCR, la expresión de las citoquinas TNF∝, IL-1∝, IL-1ß e IL-6 a 1, 12 y 24 h de exposición. Los resultados demostraron que dosis bajas de extractos clostridiales (0.2 a 0.8 μg/ml) son capaces de inducir expresiones de TNF∝, IL-1∝, e IL-1ß a 1, 12 y 24 h de incubación, a diferencia de dosis altas donde no sobrepasan la expresión de las citoquinas en leucocitos no estimulados (control). No se evidencia producción considerable de IL-6 hasta las 24 h post exposición a extracto completo de C. perfringens. Los resultados indican que el C. perfringens y sus toxinas a dosis bajas inducen la activación de los leucocitos circulantes de alpacas produciendo la secreción de citoquinas proinflamatorias.Descargas
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Derechos de autor 2013 Luis Tambillo G., Alberto Manchego S., Kim-Lam Chiok C., Nieves Sandoval C., Juan More B., Hermelinda Rivera G.
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